(فلوسیتومتری جریان ، FCM) یک آنالایزر سلولی است که شدت فلورسانس نشانگرهای سلول رنگ آمیزی را اندازه گیری می کند. این یک فناوری فناوری پیشرفته است که بر اساس تجزیه و تحلیل و مرتب سازی سلولهای منفرد ساخته شده است. این می تواند به سرعت اندازه ، ساختار داخلی ، DNA ، RNA ، پروتئین ها ، آنتی ژن ها و سایر خصوصیات فیزیکی یا شیمیایی سلول ها را اندازه گیری و طبقه بندی کند و می تواند بر اساس جمع آوری این طبقه بندی ها باشد.
فلوسیتومتر جریان عمدتا از پنج قسمت زیر تشکیل شده است:
1 محفظه جریان و سیستم سیال
2 منبع نور لیزر و سیستم شکل دهی پرتو
3 سیستم نوری
4 سیستم الکترونیکی ، ذخیره سازی ، نمایش و تجزیه و تحلیل
5 سیستم مرتب سازی سلول
در میان آنها ، تحریک لیزر در منبع نور لیزر و سیستم تشکیل پرتو ، اندازه گیری اصلی سیگنال های فلورسانس در فلوسیتومتری جریان است. شدت نور تحریک و زمان قرار گرفتن در معرض مربوط به شدت سیگنال فلورسانس است. لیزر یک منبع نور منسجم است که می تواند یک روش تک موج ، با شدت بالا و روشنایی با استحکام بالا را فراهم کند. این منبع نور ایده آل برای برآورده کردن این الزامات است.
دو لنز استوانه ای بین منبع لیزر و محفظه جریان وجود دارد. این لنزها یک پرتو لیزر را با یک مقطع دایره ای که از منبع لیزر ساطع می شود ، به یک پرتوی بیضوی با یک مقطع کوچکتر (22 میکرومتر × 66 میکرومتر) متمرکز می کند. انرژی لیزر در این پرتو بیضوی با توجه به توزیع طبیعی توزیع می شود و از شدت روشنایی مداوم برای سلولهای عبور از ناحیه لیزر اطمینان می دهد. از طرف دیگر ، سیستم نوری از مجموعه های متعدد لنزها ، سوراخ ها و فیلترها تشکیل شده است که می تواند تقریباً به دو گروه تقسیم شود: بالادست و پایین دست محفظه جریان.
سیستم نوری در مقابل محفظه جریان از لنز و سوراخ سوراخ تشکیل شده است. عملکرد اصلی لنز و سوراخ سوراخ (معمولاً دو لنز و یک سوراخ سوراخ) تمرکز پرتو لیزر با یک مقطع دایره ای است که توسط منبع لیزر ساطع شده در پرتو بیضوی با یک مقطع کوچکتر است. این انرژی لیزر را با توجه به توزیع طبیعی توزیع می کند ، و از شدت روشنایی مداوم برای سلول ها در ناحیه تشخیص لیزر و به حداقل رساندن تداخل در نور ولگرد استفاده می کند.
سه نوع اصلی فیلتر وجود دارد:
1: فیلتر پاس بلند (LPF) - فقط اجازه می دهد تا نور با طول موج بالاتر از یک مقدار خاص از آن عبور کند.
2: فیلتر کوتاه گذر (SPF) - فقط اجازه می دهد تا نور با طول موج زیر یک مقدار خاص از آن عبور کند.
3: فیلتر باند (BPF) - فقط اجازه می دهد تا نور در یک محدوده طول موج خاص از آن عبور کند.
ترکیب های مختلف فیلترها می توانند سیگنال های فلورسانس را در طول موج های مختلف به لوله های فتوموپلی فردی (PMT) هدایت کنند. به عنوان مثال ، فیلترهای تشخیص فلورسانس سبز (FITC) در مقابل PMT LPF550 و BPF525 هستند. فیلترهای مورد استفاده برای تشخیص فلورسانس نارنجی قرمز (PE) در مقابل PMT LPF600 و BPF575 هستند. فیلترهای تشخیص فلورسانس قرمز (CY5) در مقابل PMT LPF650 و BPF675 هستند.
فلوسیتومتری جریان عمدتا برای مرتب سازی سلول استفاده می شود. با پیشرفت فناوری رایانه ، توسعه ایمونولوژی و اختراع فناوری آنتی بادی مونوکلونال ، کاربردهای آن در زیست شناسی ، پزشکی ، داروخانه و سایر زمینه ها به طور فزاینده ای گسترده می شوند. این برنامه ها شامل تجزیه و تحلیل دینامیک سلولی ، آپوپتوز سلول ، تایپ سلول ، تشخیص تومور ، تجزیه و تحلیل اثربخشی دارو و غیره است.
زمان پست: سپتامبر 21-2023
