(فلوسایتومتری، FCM) یک آنالیزور سلولی است که شدت فلورسانس نشانگرهای سلولی رنگ‌آمیزی شده را اندازه‌گیری می‌کند. این یک فناوری پیشرفته است که بر اساس تجزیه و تحلیل و مرتب‌سازی سلول‌های منفرد توسعه یافته است. این دستگاه می‌تواند به سرعت اندازه، ساختار داخلی، DNA، RNA، پروتئین‌ها، آنتی‌ژن‌ها و سایر خواص فیزیکی یا شیمیایی سلول‌ها را اندازه‌گیری و طبقه‌بندی کند و می‌تواند بر اساس جمع‌آوری این طبقه‌بندی‌ها باشد.
دستگاه فلوسایتومتری عمدتاً از پنج بخش زیر تشکیل شده است:
۱ محفظه جریان و سیستم سیالات
۲ منبع نور لیزر و سیستم شکل‌دهی پرتو
۳ سیستم نوری
۴ الکترونیک، ذخیره‌سازی، نمایش و سیستم تحلیل
سیستم مرتب‌سازی سلولی ۵
در میان آنها، تحریک لیزری در منبع نور لیزر و سیستم تشکیل پرتو، اندازه‌گیری اصلی سیگنال‌های فلورسانس در فلوسایتومتری است. شدت نور تحریک و زمان نوردهی به شدت سیگنال فلورسانس مربوط می‌شود. لیزر یک منبع نور منسجم است که می‌تواند روشنایی تک طول موج، شدت بالا و پایداری بالا را فراهم کند. این منبع نور تحریک ایده‌آل برای برآورده کردن این الزامات است.
دو لنز استوانه‌ای بین منبع لیزر و محفظه جریان وجود دارد. این لنزها، پرتو لیزر با سطح مقطع دایره‌ای ساطع شده از منبع لیزر را به یک پرتو بیضوی با سطح مقطع کوچکتر (22 میکرومتر × 66 میکرومتر) متمرکز می‌کنند. انرژی لیزر درون این پرتو بیضوی طبق یک توزیع نرمال توزیع می‌شود و شدت روشنایی ثابتی را برای سلول‌هایی که از ناحیه تشخیص لیزر عبور می‌کنند، تضمین می‌کند. از سوی دیگر، سیستم نوری شامل چندین مجموعه لنز، روزنه و فیلتر است که می‌توان آنها را تقریباً به دو گروه تقسیم کرد: بالادست و پایین‌دست محفظه جریان.
سیستم نوری جلوی محفظه جریان از یک لنز و یک سوراخ سوزنی تشکیل شده است. عملکرد اصلی لنز و سوراخ سوزنی (معمولاً دو لنز و یک سوراخ سوزنی) متمرکز کردن پرتو لیزر با سطح مقطع دایره‌ای ساطع شده توسط منبع لیزر به یک پرتو بیضوی با سطح مقطع کوچکتر است. این کار انرژی لیزر را طبق یک توزیع نرمال توزیع می‌کند و شدت روشنایی ثابتی را برای سلول‌ها در سراسر ناحیه تشخیص لیزر تضمین می‌کند و تداخل ناشی از نورهای پراکنده را به حداقل می‌رساند.
سه نوع اصلی فیلتر وجود دارد:
۱: فیلتر عبور طولانی (LPF) - فقط به نور با طول موج‌های بالاتر از یک مقدار خاص اجازه عبور می‌دهد.
۲: فیلتر کوتاه‌گذر (SPF) - فقط به نور با طول موج‌های پایین‌تر از یک مقدار خاص اجازه عبور می‌دهد.
۳: فیلتر میان‌گذر (BPF) - فقط به نور در یک محدوده طول موج خاص اجازه عبور می‌دهد.
ترکیبات مختلف فیلترها می‌توانند سیگنال‌های فلورسانس را در طول موج‌های مختلف به لوله‌های فتومولتی‌پلایر (PMT) مجزا هدایت کنند. به عنوان مثال، فیلترهای تشخیص فلورسانس سبز (FITC) در مقابل PMT عبارتند از LPF550 و BPF525. فیلترهای مورد استفاده برای تشخیص فلورسانس نارنجی-قرمز (PE) در مقابل PMT عبارتند از LPF600 و BPF575. فیلترهای تشخیص فلورسانس قرمز (CY5) در مقابل PMT عبارتند از LPF650 و BPF675.
فلوسایتومتری عمدتاً برای مرتب‌سازی سلول‌ها استفاده می‌شود. با پیشرفت فناوری کامپیوتر، توسعه ایمونولوژی و اختراع فناوری آنتی‌بادی مونوکلونال، کاربردهای آن در زیست‌شناسی، پزشکی، داروسازی و سایر زمینه‌ها به طور فزاینده‌ای در حال گسترش است. این کاربردها شامل تجزیه و تحلیل دینامیک سلولی، آپوپتوز سلولی، تعیین نوع سلول، تشخیص تومور، تجزیه و تحلیل اثربخشی دارو و غیره است.
زمان ارسال: ۲۱ سپتامبر ۲۰۲۳
